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Leica顯微鏡浸沒鏡油技術指南

更新時間:2025-04-09      點擊次數:713

Leica顯微鏡浸沒鏡油技術指南

——高分辨率成像的關鍵要素

 

一、浸沒油原理與光學意義

浸沒油通過填補物鏡前端與樣本蓋玻片之間的空氣間隙(n=1.0),匹配玻璃折射率(n1.515),顯著提升數值孔徑(NA)并減少光散射。Leica油鏡(如100x/1.47 NA)通過浸沒油可實現:

 

分辨率提升約30%(理論分辨率=0.61λ/NA

 

增強圖像對比度與信噪比

 

減少球面像差(尤其厚樣本成像時)

 

二、Leica鏡油核心技術參數

型號 折射率(n) @23°C 動態粘度(cSt) 適用場景

Type F 1.518 (±0.0005) 300 常規熒光/明場(ISO 8036標準)

Type DF 1.515 150 快速掃描活細胞成像

UV兼容型 1.518 280 多光子/深紫外激發

關鍵特性:

 

嚴格色散匹配(Δn<0.0003 across 450-700nm

 

零熒光背景(經HPLC純化)

 

抗結晶配方(長期穩定性>2年)

 

三、操作規范與常見問題

1. 正確使用方法

 

滴加量:1-2滴(覆蓋物鏡前透鏡80%面積)

 

清潔流程:

 

復制

1. Leica專用清潔紙(無纖維殘留)  

2. 二甲苯擦拭殘留油漬(僅限非塑料部件)  

3. 乙醇去除溶劑殘留(純度≥99.7%)  

2. 故障排除

 

現象 可能原因 解決方案

圖像邊緣模糊 油層中有氣泡 輕轉調焦旋鈕排除氣泡

熒光強度衰減 油劑光降解 更換UV穩定型鏡油

油劑結晶 溫濕度驟變 恒溫儲存(18-25°C

四、特殊應用場景優化

活細胞成像:使用低粘度Type DF油(剪切力降低60%

 

三維重構:需每4小時補油(蒸發率<0.1μL/h @37°C

 

共聚焦成像:選擇抗光漂白型號(透光率>99% @488/561nm

 

五、技術驗證數據

Leica鏡油經ISO 10993-5細胞毒性認證,與主流封片劑(如ProLong Diamond)兼容性測試:

 

無交聯反應(接觸48小時后ΔRI0.0001

 

熒光淬滅率<2%/h(對比競品平均5-8%/h

 

文檔設計建議:

 

添加Leica提供的折射率-波長曲線圖

 

附錄包含物鏡兼容性對照表(如HC PL APO系列)

 

重點數據用高亮文本框強調


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