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TrypLE™ Express酶(1X)無酚紅版本在細胞培養中的應用與技術創新

更新時間:2025-08-27      點擊次數:197

內容簡介:
TrypLE™ Express酶(1X)不含酚紅是一種非動物源性重組胰蛋白酶替代物,廣泛應用于細胞解離和傳代培養。相較于傳統胰蛋白酶,其成分明確、穩定性高,且不含酚紅,避免了光學檢測中的干擾,尤其適用于高靈敏度實驗如流式細胞術和熒光顯微成像。本文綜述了TrypLE™ Express酶(1X)無酚紅的技術原理、性能優勢及在干細胞、原代細胞培養中的關鍵應用,并探討了其標準化操作對實驗可重復性的影響。

關鍵詞:
TrypLE™ Express、無酚紅、細胞解離、非動物源性、重組胰蛋白酶

正文:
在生物醫藥和細胞生物學研究中,細胞解離技術的標準化與安全性日益受到重視。TrypLE™ Express酶(1X)不含酚紅作為一款創新的重組胰蛋白酶替代物,通過基因工程表達的重組蛋白酶(主要為胰蛋白酶類似物)實現高效細胞解離,同時避免了動物源性成分(如豬源胰蛋白酶)帶來的批間差異和病原體風險。

技術優勢分析

  1. 無酚紅設計:酚紅的去除消除了其在吸光度檢測(如ELISA)或熒光實驗中的背景干擾,尤其適用于CRISPR編輯細胞篩選等高通量檢測。

  2. 溫和解離特性:其優化的pH緩沖體系(含EDTA)可減少細胞膜損傷,提升原代細胞和干細胞的存活率(文獻報道可達>90%)。

  3. 穩定性與兼容性:室溫下活性保持穩定,且與血清培養基直接中和,簡化了操作流程。

應用場景拓展

  • 類器官培養:無酚紅配方避免了對類器官形態學分析的干擾。

  • GMP生產:符合藥用輔料標準(如USP-NF),支持臨床級細胞治療產品的開發。

行業趨勢
隨著監管機構對動物源性試劑限制的加強(如EMA指南),TrypLE™ Express等合成酶制劑的市場需求將持續增長。未來,其與微流控芯片或自動化培養系統的整合或成為技術突破點。



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