槍頭選擇與適配:優(yōu)先使用 Eppendorf 原裝低吸附槍頭(如貨號(hào) 0030073124,10 μL 規(guī)格),其內(nèi)壁經(jīng)特殊硅化處理,液體殘留量<0.1 μL,避免微量樣品損失,需將移液器槍頭錐部對(duì)準(zhǔn)槍頭管口,輕輕旋轉(zhuǎn)按壓,確保密封(可聽到 “咔嗒" 聲),避免因密封不嚴(yán)導(dǎo)致的體積偏差(偏差可達(dá) 2%-3%)。
吸液與排液速度控制:采用 “慢吸慢排" 原則 —— 吸液時(shí),將按鈕緩慢按至第一停點(diǎn)(量程設(shè)定點(diǎn)),等待 1-2 秒(尤其黏稠樣品,如甘油溶液),確保液體吸入槍頭;排液時(shí),先將槍頭貼壁(與容器壁呈 10°-15° 角),緩慢按至第一停點(diǎn),停留 1 秒后繼續(xù)按至第二停點(diǎn),排出殘留液體,避免微量樣品殘留(如 0.1 μL 殘留對(duì) 1 μL 移液的誤差影響達(dá) 10%)。
量程調(diào)節(jié)技巧:調(diào)節(jié)量程時(shí),需遵循 “從大到小" 原則(如從 10 μL 調(diào)至 2 μL,直接逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)旋鈕至 2 μL;若需從 2 μL 調(diào)至 10 μL,需先調(diào)至 15 μL 再回調(diào)至 10 μL),避免旋鈕過度旋轉(zhuǎn)導(dǎo)致內(nèi)部齒輪磨損,影響精度。同時(shí),禁止將量程調(diào)至超過移液器的最大量程(如 10 μL 移液器調(diào)至 11 μL),否則會(huì)損壞活塞密封件。
重心控制與姿勢(shì):利用 Eppendorf 移液器的人體工學(xué)手柄設(shè)計(jì)(重心與手指握持點(diǎn)重合),握持時(shí)手掌自然貼合手柄,手腕保持水平,避免彎腰或聳肩操作(長(zhǎng)期可導(dǎo)致手腕勞損)。移液時(shí),以肘部為支點(diǎn),帶動(dòng)手臂移動(dòng),而非僅靠手指發(fā)力,減少操作疲勞的同時(shí),確保移液路徑穩(wěn)定,體積偏差<0.5%。
多通道移液器的一致性控制:使用 Eppendorf 8 通道 / 12 通道移液器(如 Research® plus 8 通道,50-300 μL)時(shí),需確保所有槍頭同時(shí)安裝到位(可將移液器垂直扣在槍頭盒上,一次性按壓安裝),避免因個(gè)別槍頭密封不嚴(yán)導(dǎo)致的通道間偏差(偏差>1%)。移液后,可通過觀察各孔液體高度是否一致,驗(yàn)證通道一致性,若發(fā)現(xiàn)偏差,及時(shí)更換槍頭重新操作。
黏稠樣品(如甘油、蛋白溶液):吸液時(shí),將按鈕按至第二停點(diǎn)(而非第一停點(diǎn)),緩慢吸入樣品,停留 3-5 秒(讓樣品充分流入槍頭),排液時(shí)同樣緩慢按至第二停點(diǎn),避免因樣品黏稠導(dǎo)致的體積不足(傳統(tǒng)操作易導(dǎo)致 10%-15% 的體積偏差)。同時(shí),選擇大口槍頭(如 Eppendorf 1000 μL 大口槍頭),減少樣品流動(dòng)阻力。
揮發(fā)性樣品(如乙醇、丙酮):此類樣品易揮發(fā)導(dǎo)致槍頭內(nèi)壓力變化,需快速完成吸液與排液操作(總時(shí)間<5 秒),且排液時(shí)確保槍頭接觸液面(避免樣品揮發(fā)后體積減少)。若需多次移取,建議每移取 3-5 次后,重新校準(zhǔn)移液器(使用 Eppendorf 校準(zhǔn)工具),確保精度。
腐蝕性試劑(如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿):使用 Eppendorf 抗腐蝕移液器(如 Research® plus Corrosion-Resistant 系列),其槍頭錐部采用 1.4404 特種不銹鋼材質(zhì),可耐受 98% 硫酸、37% 鹽酸。操作時(shí)需佩戴手套,避免試劑接觸移液器主體(若不慎接觸,立即用 70% 乙醇擦拭),且移液后及時(shí)更換槍頭,避免試劑殘留腐蝕槍頭錐部。
外部清潔:每日實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用 70% 乙醇擦拭移液器主體(尤其是手柄、按鈕、槍頭錐部),去除樣品殘留(如蛋白、核酸),避免殘留樣品干燥后堵塞槍頭錐部或腐蝕材質(zhì)。若接觸過放射性或有毒樣品,需使用專用消毒劑(如含氯消毒劑)擦拭,再用超純水清潔,最后用 70% 乙醇消毒。
內(nèi)部清潔與滅菌:若移液器內(nèi)部被樣品污染(如樣品倒吸進(jìn)入移液器),需拆解移液器(參照 Eppendorf 拆解指南),用超純水沖洗內(nèi)部活塞、彈簧等部件,晾干后重新組裝。對(duì)于需要無菌操作的場(chǎng)景(如細(xì)胞培養(yǎng)),可將移液器槍頭錐部拆下,進(jìn)行 121℃高壓滅菌(20 分鐘),滅菌后晾干再安裝使用(Eppendorf Research® plus 系列的槍頭錐部支持高壓滅菌,其他部件禁止滅菌)。
校準(zhǔn)周期:普通實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景(如常規(guī)移液)每 6 個(gè)月校準(zhǔn) 1 次;高頻使用(如每日移液 100 次以上)或接觸腐蝕性試劑的場(chǎng)景,每 3 個(gè)月校準(zhǔn) 1 次。校準(zhǔn)需使用 Eppendorf 原裝校準(zhǔn)工具(如貨號(hào) 0030108556 校準(zhǔn)套裝),或委托 Eppendorf 服務(wù)團(tuán)隊(duì)進(jìn)行專業(yè)校準(zhǔn)(符合 ISO 8655 標(biāo)準(zhǔn))。
簡(jiǎn)易校準(zhǔn)方法(實(shí)驗(yàn)室自查):使用分析天平(精度 0.01 mg)、超純水(25℃,密度 1 g/mL)進(jìn)行自查 —— 設(shè)定移液器量程(如 100 μL),移取超純水至稱量皿中,記錄重量,重復(fù) 5 次,計(jì)算平均值與理論值(100 mg)的偏差,若偏差>±1%,需進(jìn)行專業(yè)校準(zhǔn)。
槍頭適配:優(yōu)先使用 Eppendorf 原裝槍頭,其與移液器槍頭錐部的配合間隙<0.001 mm,確保密封精度,避免因非原裝槍頭的尺寸偏差導(dǎo)致的體積誤差(偏差可達(dá) 3%-5%)。上海易匯生物提供 Eppendorf 原裝槍頭的現(xiàn)貨供應(yīng),當(dāng)日下單次日送達(dá),可避免因槍頭短缺導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)中斷。
濾芯更換:對(duì)于配備疏水濾芯的移液器(如 Research® plus 帶濾芯系列),當(dāng)移取易污染樣品(如病毒、細(xì)菌)后,需及時(shí)更換濾芯(Eppendorf 原裝濾芯貨號(hào) 0030073185),避免樣品進(jìn)入移液器內(nèi)部造成交叉污染。建議每移取 50 次污染樣品更換 1 次濾芯,常規(guī)樣品每 3 個(gè)月更換 1 次。
禁止超量程使用:嚴(yán)格按照移液器的量程范圍操作(如 10 μL 移液器禁止移取 11 μL 樣品),超量程會(huì)導(dǎo)致內(nèi)部活塞過度拉伸或壓縮,損壞密封件,影響精度(修復(fù)成本可達(dá)設(shè)備價(jià)格的 30%)。
禁止槍頭未安裝時(shí)按壓按鈕,按壓按鈕會(huì)導(dǎo)致活塞直接暴露,若有灰塵或雜質(zhì)進(jìn)入,會(huì)磨損活塞表面,導(dǎo)致密封不良(表現(xiàn)為移液體積偏差突然增大)。
禁止移液器倒置或傾斜存放:移液后若槍頭內(nèi)殘留液體,倒置或傾斜存放會(huì)導(dǎo)致液體流入移液器內(nèi)部,腐蝕電路(電動(dòng)移液器)或彈簧(手動(dòng)移液器),建議使用 Eppendorf 移液器支架(如貨號(hào) 0030122470)垂直存放。
交叉污染防控:移取不同樣品時(shí),必須更換槍頭,禁止重復(fù)使用槍頭(即使移取同一種樣品,也需避免槍頭接觸容器壁后交叉污染)。對(duì)于高風(fēng)險(xiǎn)樣品(如病原微生物、有毒試劑),需在生物安全柜內(nèi)操作,且移液器使用后需進(jìn)行表面消毒(70% 乙醇擦拭)。
人員防護(hù):移取腐蝕性、揮發(fā)性試劑時(shí),需佩戴手套、護(hù)目鏡,避免試劑接觸皮膚或吸入揮發(fā)氣體。若試劑不慎接觸皮膚,立即用大量清水沖洗,必要時(shí)就醫(yī)。
耗材儲(chǔ)存與管理:Eppendorf 槍頭、濾芯等耗材需存放在干燥、潔凈的環(huán)境中(溫度 15-25℃,相對(duì)濕度 30%-60%),避免高溫高濕導(dǎo)致耗材變質(zhì)(如槍頭內(nèi)壁硅化層脫落)。上海易匯生物的期貨定制服務(wù)可根據(jù)科研周期提前 30-60 天鎖定耗材產(chǎn)能,確保耗材儲(chǔ)存條件穩(wěn)定,避免因耗材變質(zhì)影響實(shí)驗(yàn)。
移液體積偏差增大:
檢查槍頭是否安裝到位(重新安裝并確認(rèn)密封);
檢查槍頭是否過期或變質(zhì)(如低吸附槍頭硅化層脫落,可更換新槍頭測(cè)試);
檢查移液器是否需要校準(zhǔn)(按前文簡(jiǎn)易校準(zhǔn)方法自查)。
按鈕按壓卡頓:
檢查按鈕是否有樣品殘留(用 70% 乙醇擦拭按鈕與手柄連接處);
檢查內(nèi)部彈簧是否生銹(若有,需聯(lián)系 Eppendorf 維修,禁止自行拆解)。
槍頭無法安裝或拆卸:
檢查槍頭錐部是否有異物(如槍頭碎片,用鑷子小心取出);
檢查槍頭錐部是否變形(若變形,需更換槍頭錐部,建議由專業(yè)人員操作)。